文献类型： 中文期刊

作者： 任秀美奥 ¹ ; 姚旭东 ¹ ; 蒙亚琦 ¹ ; 郭延华 ² ; 唐红 ² ; 张译元 ² ; 赵兴旺 ³ ; 王立民 ² ; 周平 ¹ ;

作者机构： 1.石河子大学动物科技学院

2.新疆农垦科学院省部共建绵羊遗传改良与健康养殖国家重点实验室

3.石河子总场农业服务发展中心

关键词： miR-449b;早期胚胎;H3K9me3;精子

期刊名称： 中国畜牧兽医

ISSN： 1671-7236

年卷期： 2022 年 007 期

页码： 2661-2668

收录情况： 北大核心

摘要： 【目的】研究miR-449b对绵羊早期胚胎发育的影响。【方法】采用Percoll密度梯度离心法获得纯化绵羊精子,将绵羊卵丘-卵母细胞复合体（COCs）在培养箱中培养16～18 h获得成熟卵母细胞,从1月龄纯种萨福克绵羊耳组织分离成纤维细胞,通过实时荧光定量PCR比较绵羊精子、成熟卵母细胞与成纤维细胞中miR-449b的相对表达量;给成熟卵母细胞分别显微注射0.9%生理盐水（Con组）、miR-449b模拟物对照（NC mimic）与miR-449b模拟物（miR-449b mimic）,注射后进行孤雌激活,分别于激活的第2、7天统计胚胎卵裂率与囊胚率;将成熟卵母细胞进行体外受精（IVF）,收集IVF、Con、NC mimic与miR-449b mimic组2-细胞胚胎,采用免疫荧光法比较组蛋白H3K9me3的变化。【结果】miR-449b在精子中的表达显著高于成熟卵母细胞和成纤维细胞（P<0.05）;与Con组相比,miR-449b mimic和NC mimic组胚胎的卵裂率均显著降低（P<0.05）,NC mimic组胚胎卵裂率显著低于miR-449b mimic组（P<0,05）;miR-449b mimic组胚胎囊胚率提高,但差异不显著（P>0.05）;IVF、Con、NC mimic与miR-449b mimic组2-细胞胚胎均表达组蛋白H3K9me3,且都在细胞核表达。与Con组相比,NC mimic组2-细胞胚胎组蛋白H3K9me3的表达水平显著增加（P<0.05）,miR-449b mimic组显著降低（P<0.05）;NC mimic组2-细胞胚胎组蛋白H3K9me3的表达水平显著高于miR-449b mimic组（P<0.05）,miR-449b mimic与IVF组无显著差异（P>0.05）。【结论】miR-449b能显著提高绵羊早期胚胎的发育率,且降低早期胚胎中H3K9me3的表达水平。