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甘薯病毒病害(SPVD)的多重RT-PCR检测方法及其应用

文献类型: 中文期刊

作者: 张盼 1 ; 兰新芝 2 ; 乔奇 1 ; 张德胜 1 ; 秦艳红 1 ; 田雨婷 1 ; 王爽 1 ; 张振臣 1 ;

作者机构: 1.河南省农业科学院植物保护研究所

2.河南省新县农业局植保站

关键词: 甘薯病毒病害;甘薯羽状斑驳病毒;甘薯褪绿矮化病毒;多重RT-PCR

期刊名称: 植物保护

ISSN: 0529-1542

年卷期: 2013 年 39 卷 02 期

页码: 86-90+100

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 根据甘薯褪绿矮化病毒(Sweet potato chlorotic stunt virus,SPCSV)热激蛋白(Hsp70)基因和甘薯羽状斑驳病毒(Sweet potato feathery mottle virus,SPFMV)外壳蛋白(CP)基因核苷酸序列的保守区域设计了4对引物,以单一RT-PCR反应体系为基础,分别对影响多重RT-PCR扩增的退火温度、Taq DNA聚合酶浓度、dNTPs浓度、Mg2+浓度、引物浓度等条件进行了优化,建立了能同时检测SPVD两种病原的多重RT-PCR方法。该方法能有效区分SPFMV的主要株系类型。灵敏性试验表明,建立的多重RT-PCR方法对SPFMV-CH2、SPFMV-CH和SPCSV的最低检测浓度分别为1.42×104、1.32×104拷贝/μL和2.47×104拷贝/μL。该方法可用于甘薯叶片和薯块中病毒的检测,为SPVD的监测预警提供了一个有用的工具。

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