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败血症鲢肝与肾cDNA文库构建及MHC classⅠ的克隆与分析

文献类型: 中文期刊

作者: 汪登强 1 ; 罗晓松 2 ; 陈大庆 2 ;

作者机构: 1.中国水产科学研究院淡水渔业研究中心

2.中国水产科学研究院长江水产研究所

关键词: 鲢;cDNA文库;MHC;肝;肾

期刊名称: 中国水产科学

ISSN: 1005-8737

年卷期: 2011 年 18 卷 06 期

页码: 1368-1376

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 采用CloneMinerTMcDNA文库构建试剂盒构建了患败血症的鲢(Hypophthalmichthys molitrix)肝和肾的cDNA文库。经检验,文库的滴度为1.34×107 cfu/mL,总库容为2.68×107 cfu,阳性克隆率为97.5%,平均插入片段大于1.2 kb。对80个随机挑选的克隆进行两端测序,结果显示有74个测序成功。经在GenBank上BLAST比对,其中57个为已知功能基因,属于45个不同基因,另外17个没有明显的同源序列。在已知功能的57个克隆中,含有全长编码区序列的克隆共有49个,全长cDNA比率为61.25%。采用PCR法对文库进行筛选,获得一个含MHC class I完整编码区的序列,该序列具有典型的脊椎动物MHC class Ⅰ的序列特征。本研究完成鲢肝和肾较高质量的cDNA文库的构建,旨在为今后开展鲢功能基因研究奠定基础。

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