文献类型： 中文期刊

作者： 余厚美 ¹ ; 王琴飞 ¹ ; 林立铭 ¹ ; 徐缓 ¹ ; 李其铸 ¹ ; 范武波 ² ; 张振文 ¹ ;

作者机构： 1.中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所/国家薯类加工技术研发分中心

2.中国热带农业科学院热带生物技术研究所

关键词： 黄曲霉毒素B₁;快速检测;酶联免疫分析;木薯粉

期刊名称： 南方农业学报

ISSN： 2095-1191

年卷期： 2021 年 010 期

页码： 2824-2833

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】基于酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测原理,建立高灵敏度的直接竞争法检测木薯粉及其制品中的黄曲霉毒素B₁（AFB₁）,为木薯食品安全提供技术支持。【方法】通过对AFB₁抗原结构改造、免疫和细胞融合等过程获得抗原抗体,建立高灵敏度检测方法,并进行木薯粉及其制品样本的实例验证。【结果】制备的AFB₁抗原和抗体,其抗体亚型均为IgG₁,灵敏度最高的3F2细胞株产生的抗体对黄曲霉毒素G₁、G₂和B₂交叉反应率分别为21.4%、1.9%和8.8%,且对其他毒素类无交叉反应,建立的ELISA线性区间为0.02～0.48μg/kg,半数抑制浓度(IC₅₀)为0.047μg/kg,标准方程为y=-3.074x-4.3066（R²=0.9978）。以35%甲醇水溶液作为标准品稀释液,木薯食品原料用70%甲醇水溶液加0.2 g NaCl作为提取液,含油脂的木薯糕点用70%甲醇水溶液作为提取液,所有样本均为10倍稀释,检测限0.2～4.8μg/kg,样品添加回收率81.5%～120.0%,变异系数均小于8.5%。应用验证试验表明,自建ELISA试剂盒对96份样本检出19份阳性样本,购买试剂盒检出7份阳性,大于2.0μg/kg的样本检测结果完全符合,自建ELISA试剂盒方法灵敏度优于购买的ELISA试剂盒。【结论】本研究建立的直接竞争ELISA方法灵敏度高,操作简单,可广泛应用于木薯粉及其制品样本中AFB1的快速测定。