文献类型： 中文期刊
作者： 陈京 1 ; 于永翔 2 ; 张正 2 ; 王印庚 2 ; 廖梅杰 2 ; 荣小军 2 ;
作者机构： 1.上海海洋大学水产与生命学院
2.中国水产科学研究院黄海水产研究所
关键词： 轮虫弧菌;toxR基因;实时荧光定量PCR;微流控快速检测
期刊名称： 水产学报
ISSN：
年卷期： 2020 年 012 期
页码：
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 以轮虫弧菌的单拷贝基因toxR基因的高保守区域为目的片段,设计特异性引物,构建重组质粒标准品,建立针对该菌的荧光定量PCR检测方法.以此为基础,实验选用UF-150 Genechecker微流控荧光定量PCR仪,通过优化反应体系和反应条件,建立了轮虫弧菌的微流控荧光定量PCR检测方法.结果显示,该方法能特异性扩增toxR基因目的片段,对轮虫弧菌纯培养物检测下限为1.34*100拷贝/μL.在人工感染样品中的应用结果显示,对鱼体组织中轮虫弧菌的检测下限为1.34*103 CFU/g,检测结果可以目视判读,检测时间缩短至42 min以内.研究表明,该检测方法具有特异性强、敏感度高、场地要求低等突出优势,适于开发水产病原实用性的现场快速检测技术.
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