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鳗弧菌膜芯片检测条件的优化

文献类型： 中文期刊

作者： 闫丽 1 ; 李晨 1 ; 张庆利 1 ; 戈蕾 1 ; 黄倢 1 ;

作者机构： 1.农业部海洋渔业资源可持续利用重点开放实验室中国水产科学研究院黄海水产研究所

关键词： 基因芯片;尼龙膜;鳗弧菌;毒力基因

期刊名称： 渔业科学进展

ISSN： 1000-7075

年卷期： 2011 年 32 卷 02 期

页码： 117-121

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 采用带正电的尼龙膜作为片基,利用手动芯片点样仪将鳗弧菌6个毒力基因的寡核苷酸探针点样于膜基底上,然后进行紫外交联,制备膜芯片。制备好的膜芯片与6个毒力基因的带有地高辛标记的PCR产物进行杂交,通过观察杂交信号来判断是否含有该基因。通过对膜芯片点样浓度、杂交时间及洗膜步骤进行优化,确定所设计膜芯片最适杂交时间为30min、点样探针最适浓度50μmol/L、洗膜过程只需要3步,时间缩短了45min。

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