文献类型: 中文期刊
作者: 冯华 1 ; 张改平 2 ; 郭军庆 2 ; 王爱萍 2 ; 赵丽娜 2 ; 杜晓明 2 ; 王林林 2 ;
作者机构: 1.郑州大学生物工程系
2.郑州大学生物工程系;河南省农业科学院农业部动物免疫学重点开放实验室河南省动物免疫学重点实验室;河南科技大学食品与生物工程学院
关键词: 对虾白斑综合征病毒;环介导等温扩增;巢式聚合酶链反应;VP28基因
期刊名称: 中国兽医科学
ISSN: 1673-4696
年卷期: 2011 年 07 期
页码: 707-711
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 根据对虾白斑综合征病毒(WSSV)囊膜蛋白VP28的基因序列设计合成4条特异性引物,以pMDT-VP28重组质粒为标准模板,通过优化反应体系和反应条件,建立了WSSV的环介导等温扩增(LAMP)检测方法,测定LAMP对WSSV-DNA的最低检测限,并与巢式PCR进行了比较。结果显示,该LAMP方法的最佳反应温度为65℃,反应时间为60min;LAMP对WSSV的最低检测限为10copies/μL,而巢式PCR为100copies/μL,表明该LAMP方法的敏感性显著高于巢式PCR检测方法。因此,WSSV的LAMP检测方法比PCR更为简便、快速、灵敏,且无需昂贵的变温仪器,更适应水产养殖的现地检测,本研究为WSSV早期感染的快速检测提供了新方法。
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