文献类型： 中文期刊

作者： 王锦祥 ¹ ; 付环茹 ¹ ; 孙世坤 ¹ ; 陈冬金 ¹ ; 高承芳 ¹ ; 桑雷 ¹ ; 谢喜平 ¹ ;

作者机构： 1.福建省农业科学院畜牧兽医研究所;福建省畜禽遗传重点实验室

关键词： 兔;A型多杀性巴氏杆菌;kmt1基因;hyaD基因;双重PCR

期刊名称： 福建畜牧兽医

ISSN： 1003-4331

年卷期： 2023 年 45 卷 005 期

页码： 20-23

摘要： 为建立一种特异性强且敏感性高的兔源A型多杀性巴氏杆菌快速检测方法,本研究以兔源A型多杀性巴氏杆菌kmt1和hyaD基因为目的基因,设计 2 对特异性引物进行双重PCR扩增,经反应条件优化,建立检测兔源A型多杀性巴氏杆菌的双重PCR方法.该方法的最佳退火温度为 57.8℃,最佳混合引物浓度为 0.8 μmol/L.该方法特异性强,对兔源A型多杀性巴氏杆菌为kmt1 和hyaD基因双阳性,对兔源D型和F型多杀性巴氏杆菌为kmt1 基因单阳性,对兔源其它细菌性病原和阴性对照则均为阴性.该方法敏感性高,对兔源A型多杀性巴氏杆菌kmt1 和hyaD基因的最低检出限分别为 1×103 拷贝/μL和 1×104 拷贝/μL.该方法重复性好,且与已报道的多重PCR方法的符合率高达 96.12%.本研究建立的双重PCR方法对兔源A型多杀性巴氏杆菌具有良好的特异性和敏感性,且重复性好、准确性高,为该病原的快速检测提供了有力的技术支持.