文献类型： 中文期刊
作者： 李海琴 1 ; 傅光华 2 ; 黄瑜 2 ; 韦启鹏 1 ; 唐维国 1 ;
作者机构： 1.江西省农业科学院畜牧兽医研究所
2.福建省农业科学院畜牧兽医研究所
关键词： H5亚型禽流感病毒;H9亚型禽流感病毒;鸭坦布苏病毒;多重PCR
期刊名称： 福建农业学报
ISSN： 1008-0384
年卷期： 2015 年 08 期
页码： 727-730
摘要： 为建立一种能同时快速检测H5、H9亚型禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)和鸭坦布苏病毒(duck Tembusu virus,DTMUV)的多重PCR检测方法,根据GenBank发表的H5、H9亚型禽流感病毒(AIV)HA基因和DTMUV的NS5基因序列,分别设计了3对特异性引物,通过优化扩增条件,建立了同时检测H5亚型AIV、H9亚型AIV和DTMUV的多重PCR检测方法,对其特异性及敏感性进行检验,并在临床中进行初步应用。结果表明,该多重PCR方法具有良好的特异性和敏感性,可同时扩增出大小分别为732bp(H9亚型AIV)、380bp(H5亚型AIV)、250bp(DTMUV)的特异片段,利用本试验建立的多重PCR对其他鸭病病原体进行扩增结果均为阴性,利用这3对引物对H5、H9亚型AIV和DTMUV进行敏感性检测,结果显示最低检测极限分别为533pg·μL-1、56pg·μL-1和6.6ng·μL-1。对临床200份样品的检测结果表明该多重PCR检测方法具有快速、敏感、特异性强等优点,适用于临床检测应用。
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