文献类型： 中文期刊
作者： 侯万伟 1 ;
作者机构： 1.青海大学农林科学院
关键词： 蚕豆(Vicia faba L.);ISSR;反应体系
期刊名称： 分子植物育种
ISSN： 1672-416X
年卷期： 2019 年 015 期
页码： 5032-5036
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 本研究通过正交设计,对蚕豆基因组ISSR反应的5个因素(镁离子,模板DNA浓度,引物浓度,dNTP浓度, Taq酶浓度)进行优化,建立蚕豆ISSR-PCR扩增体系.通过正交设计试验确定的PCR扩增体系为(20μL):10*缓冲液2.0μL,引物浓度3 mmol/L、dNTPs浓度0.4 mmol/L、Taq DNA聚合酶浓度1.0 U、基因组DNA 200 ng、Mg2+浓度1.5 mmol/L.反应程序为:95℃变性5 min;95℃变性45 s;52℃退火30 s,72℃延伸90 s,循环35次;72℃延伸8 min,4℃保存.通过试验建立的反应体系扩增稳定,扩增的条带清晰,该体系为后续蚕豆种质资源鉴定、性状的分子标记等研究提供了科学依据.
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