文献类型： 中文期刊

作者： 周天赐 ¹ ; 毛立 ² ; 李文良 ² ; 郝飞 ² ; 魏建忠 ² ; 江杰元 ² ;

作者机构： 1.安徽农业大学动物科技学院

2.安徽农业大学动物科技学院;江苏省农业科学院兽医研究所农业部生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心

关键词： 山羊副流感病毒3型;HN蛋白;单克隆抗体;鉴定;IFA

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2016 年 04 期

页码： 436-441

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为制备山羊副流感病毒3型(caprine parainfluenza virus type 3,CPIV3)HN蛋白单克隆抗体,将CPIV3 HN基因1081~1725 bp片段(编码361~574 aa)克隆入原核表达载体p ET-32a(+),构建重组表达质粒p ET-32a(+)-HN361-574 aa,转化至大肠杆菌Rosetta(BL21)感受态细胞并进行诱导表达,分别用SDS-PAGE和Western-blot鉴定重组表达蛋白。结果表明,CPIV3 HN蛋白361~574 aa片段被正确表达。用两段截短的HN蛋白混合免疫BALB/c小鼠,取小鼠脾与骨髓瘤细胞SP2/0融合制备单克隆抗体,分别用间接ELISA、Western-blot和IFA筛选和鉴定融合细胞上清。通过筛选获得3株杂交瘤细胞,分别命名为3F1、4A7、4H4,进一步研究表明,这3种单克隆抗体至少识别2个不同的抗原表位。本研究为CPIV3病原学检测方法的建立以及病理学诊断奠定了重要的基础。