文献类型： 中文期刊

作者： 朱琳 ¹ ; 孙冰 ¹ ; 孙杰 ¹ ; 郭容利 ¹ ; 范宝超 ¹ ; 李彬 ¹ ; 索朗斯珠 ¹ ; 何孔旺 ¹ ;

作者机构： 1.西藏农牧学院动物科学学院;江苏省农业科学院兽医研究所

关键词： 猪流行性腹泻病毒(PEDV);JS2008株;传代培养;遗传变异

期刊名称： 南方农业学报

ISSN： 2095-1191

年卷期： 2018 年 49 卷 09 期

页码： 1833-1840

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】明确猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)JS2008株的序列特征及其连续传代后的序列变化规律,为筛选出新的疫苗候选毒株提供参考依据。【方法】将分离自华东地区某发病猪场的PEDV JS2008株在Vero细胞系上传代培养至100代,选取部分代次进行病毒滴度测定;每隔10代提取病毒RNA,采用RT-PCR对各代次病毒的S基因、ORF3基因和N基因进行扩增,并与PEDV经典和流行参考毒株进行序列比对及遗传变异分析。【结果】PEDV JS2008株经连续传代至100代,其病毒滴度由105.5TCID50/0.1 mL上升至107.5TCID50/0.1 mL。JS2008株在传代过程中共有11处碱基发生突变,其中9处发生在传代培养的第10～20代,变异主要位于S基因上(7/11);同时发现JS2008株及其传代株与attenuated DR13株的相似性最高。基于S基因和N基因序列构建的PEDV系统发育进化树均表明JS2008株各代次与attenuated DR13株同处于Group 3进化群;基于ORF3基因序列构建的PEDV系统发育进化树则显示,JS2008株各代次与attenuated DR13株均处于同一进化群(Group 2)。【结论】PEDV JS2008株通过Vero细胞系进行体外连续传代至100代,其碱基突变主要发生在病毒传代培养的第10～20代,病毒滴度明显提高,抗原量增加,为研制新型PEDV疫苗提供可能,同时推测病毒传代培养10～20代是病毒发生变异以适应细胞培养的活跃期。