文献类型： 中文期刊
作者： 王锦祥 1 ; 程晓霞 1 ; 陈少莺 1 ; 陈仕龙 1 ; 林锋强 1 ; 王劭 1 ; 李兆龙 1 ;
作者机构： 1.福建省农业科学院畜牧兽医研究所
关键词： 新型鸭呼肠孤病毒;σC蛋白;原核表达;Western blotting;抗原性
期刊名称： 福建农业学报
ISSN： 1008-0384
年卷期： 2014 年 04 期
页码： 310-313
摘要： 应用原核表达系统表达新型鸭呼肠孤病毒σC基因,分析σC蛋白的抗原性。根据已登录的新型鸭呼肠孤病毒(NDRV)NP03株S1基因序列,针对σC基因设计并合成1对特异性引物,用RT-PCR扩增该基因,并将此片段克隆到原核表达载体pET-30a(+)上,将序列正确的重组质粒命名为pET-NDRV-σC,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,1.0mmol·L-1 IPTG 37℃诱导表达。结果显示,RT-PCR扩增得到966bp的目的片段;表达产物经SDS-PAGE分析,获得了与预期相符的约41.3ku的条带,重组蛋白主要以包涵体形式存在;Western blotting分析显示,重组蛋白能与NDRV阳性血清发生反应。本试验首次应用原核表达系统获得NDRVσC蛋白,并证明其具有免疫反应性。
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