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奥尔森帕金虫环介导等温扩增(LAMP)检测方法的建立及应用

文献类型： 中文期刊

作者： 曲朋 1 ; 王崇明 2 ; 任伟成 3 ; 梁彦韬 2 ; 贾志磊 1 ; 黄倢 2 ; 潘鲁青 1 ;

作者机构： 1.中国海洋大学教育部海水养殖重点实验室

2.中国水产科学研究院黄海水产研究所

3.哥德堡大学

关键词： 奥尔森帕金虫;内转录间隔区;环介导等温扩增;贝类;检测

期刊名称： 水产学报

ISSN： 1000-0615

年卷期： 2012 年 36 卷 08 期

页码： 1281-1289

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 奥尔森帕金虫是重要的贝类病原性寄生虫之一,为建立快速、灵敏、准确和使用简便的检测方法,实验根据奥尔森帕金虫5.8S rDNA中的内转录间隔区(internal transcribedspacer,ITS)序列,建立了环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检测方法,并对反应温度、反应体系中Mg2+浓度和反应时间进行了优化。该方法的检测灵敏度约为30拷贝质粒DNA,并且特异性较强,与海水帕金虫、包纳米虫、波豆虫及急性病毒性坏死病毒(acute viral necrosis virus,AVNV)等病原均无交叉反应。使用LAMP法对两批菲律宾蛤仔样品进行检测,结果表明,LAMP检测与传统PCR检测相比,灵敏度更高,检测结果更准确。实验所建立的奥尔森帕金虫LAMP检测方法简单、快速、灵敏且特异性强,可以在沿海贝类养殖厂及条件简陋的实验室使用。

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