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杧果MiCAO基因的克隆及植物超表达载体构建

文献类型： 中文期刊

作者： 熊娟 1 ; 俞凯莉 1 ; 赵志常 2 ; 傅小鹏 3 ;

作者机构： 1.华中农业大学园艺林学学院

2.中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所

3.园艺植物生物学教育部重点实验室

关键词： 杧果;叶绿素酸酯a加氧酶;MiCAO;基因克隆;载体构建

期刊名称： 分子植物育种

ISSN： 1672-416X

年卷期： 2024 年 003 期

页码： 800-806

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 叶绿素是植物重要的光合色素之一，其含量影响着植物最终合成的生物量或产量。CAO（Chlorophyllide a oxygenas）是叶绿素生物合成的关键限速酶之一，主要参与叶绿素b的形成。为探究杧果CAO基因的生物学功能，本研究利用RACE技术，从杧果‘金煌’品种中克隆得到MiCAO基因并对其蛋白序列进行相应的生物信息学分析、构建其植物超表达载体进行亚细胞定位和基因功能验证。本试验克隆了杧果MiCAO基因，该基因全长cDNA序列为2 151 bp，开放阅读框为1 608 bp，编码535个氨基酸。进化树分析表明，MiCAO蛋白与双子叶植物的开心果Pv CAO蛋白的亲缘关系最近。利用植物瞬时表达技术转化烟草，对MiCAO蛋白进行亚细胞定位显示MiCAO蛋白定位于细胞质和细胞核中；对MiCAO进行基因功能验证，结果表明转基因株系表型与野生型无明显差异，推测MiCAO基因可能不是调控叶绿素生物合成途径中的主效基因，为研究杧果叶绿素生物合成提供了一定的理论参考依据。

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