文献类型： 中文期刊
作者： 谢纯政 1 ; 李万福 1 ; 刘海燕 1 ; 李玲 2 ; 梁炫强 1 ;
作者机构： 1.广东省农业科学院作物研究所
2.华南师范大学生命科学学院
关键词： 花生;AhPIP1;克隆;原核表达
期刊名称： 分子植物育种
ISSN： 1672-416X
年卷期： 2009 年 7 卷 01 期
页码： 177-183
收录情况： CSCD
摘要： 本文采用RACE法克隆了花生病程诱导基因(pathogenesis-induced protein gene)全长,命名为AhPIP1,并在GenBank登录,登录号为EU860093。序列分析表明该基因的开放读码框579bp,编码193个氨基酸。以YY20基因组DNA为模板PCR扩增获得AhPIP1基因组序列长1883bp,包含3个外显子和长度分别为602bp和600bp的2个内含子。同源性比较发现AhPIP1与辣椒病程诱导蛋白CaPIP1(ABF72432,AAT35532)相似性达82%。采用Genome Walking方法获得AhPIP1启动子,序列分析表明该启动子序列长513bp,包含干旱胁迫、病程胁迫应答元件和生长素、赤霉素应答元件。构建pET32a-AhPIP1原核表达载体,转化表达受体菌E.coli BL21,原核表达获得大小约40kD AhPIP1融合蛋白,与推测的AhPIP1基因编码产物的大小一致,表明AhPIP1基因在大肠杆菌中能够表达。
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