文献类型: 中文期刊
作者: 赵慧君 1 ; 赵旭阳 1 ; 史西保 2 ; 陈静 1 ; 范小敏 3 ; 司朝朝 2 ; 王丽 2 ; 李青梅 2 ; 常晓博 2 ; 李雪莹 3 ; 付建蒙 3 ; 徐雅甜 3 ; 邓瑞广 2 ; 张改平 1 ;
作者机构: 1.河南农业大学生命科学学院
2.河南省农业科学院动物免疫学重点实验室
3.河南师范大学生命科学学院
关键词: PRRSV;nsp1α;多克隆抗体
期刊名称: 安徽农业科学
ISSN: 0517-6611
年卷期: 2019 年 47 卷 012 期
页码: 115-119,131
摘要: 以真核质粒pcDNA3.1-flag-nsp1α为模板,利用PCR扩增出nsp1α基因片段,构建原核重组载体pET32a-nsp1α,转化到大肠杆菌BL21(DE3)感受态,1 mmol/L IPTG在37℃诱导表达6 h,成功获得以包涵体形式存在的重组蛋白,能够与小鼠抗His标签单克隆抗体反应;包涵体复性后作为抗原免疫新西兰大白兔,3次免疫后20 d获得兔多抗血清.通过间接ELISA、Western blot、间接免疫荧光、免疫组化等试验获得了高效价的兔多抗血清,该血清能够特异性地识别真核质粒表达的nsp1α以及PRRSV BJ4株.该试验成功表达了pET32a-nsp1α重组蛋白,并制备了高效价、高特异性的兔抗nsp1α多克隆抗体.
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