文献类型： 中文期刊
作者： 张海棠 1 ; 王自良 1 ; 邓瑞广 2 ; 张改平 2 ; 范国英 1 ; 姜金庆 1 ;
作者机构： 1.河南科技学院动物科学学院
2.河南省动物免疫学重点实验室
关键词： 莱克多巴胺;人工抗原;单克隆抗体;竞争ELISA;快速检测试剂盒
期刊名称： 中国生物工程杂志
ISSN： 1671-8135
年卷期： 2009 年 29 卷 01 期
页码： 50-55
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 用混合酸酐法(MA)将莱克多巴胺(RAC)偶联于牛血清白蛋白(BSA),合成人工抗原BSA-RAC,用UV和SDS-PAGE鉴定;用BSA-RAC免疫Balb/c小鼠,细胞融合技术建立高亲和力RAC单克隆抗体(mAb)杂交瘤细胞株,体内诱生腹水法制备RAC mAb;应用RAC mAb研制RAC残留快速检测ciELISA试剂盒(RAC-Kit),并测定其性能。结果表明,BSA-RAC偶联成功,分子结合比为24.5∶1;筛选出3株杂交瘤细胞,其中最好的4D8株亲和常数(Ka)为1.65×1010L/mol;RAC-Kit的检测限为0.5ng/ml,检测范围为0.5~151ng/ml,饲料样、猪尿样的平均添加回收率为87.2%,89.4%,平均批内和批间变异系数小于15%,与多巴酚丁胺的交叉反应率(CR%)为9.7%,与其它化合物无CR,RAC-Kit在4℃保存期为180d。
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