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口蹄疫3D蛋白N端T细胞表位重组蛋白的表达、纯化及鉴定

文献类型： 中文期刊

作者： 卢清侠 1 ; 王世红 1 ; 金前跃 1 ; 李清州 2 ; 郝慧芳 1 ; 张改平 1 ;

作者机构： 1.河南省农业科学院农业部动物免疫学重点开放实验室/河南省动物免疫学重点实验室

2.河南省农业科学院农业经济与信息研究中心

关键词： 口蹄疫;3D聚合酶;T细胞表位重组蛋白;原核表达;疫苗佐剂

期刊名称： 河南农业科学

ISSN： 1004-3268

年卷期： 2012 年 41 卷 09 期

页码： 133-137

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为获得具有抗原性的口蹄疫病毒(FMDV)3D蛋白N端T细胞表位的重组表达蛋白,根据FMDV3D蛋白前115位氨基酸序列,设计优化并人工合成相应的核酸序列,将其克隆至pET-28a中,构建原核表达质粒pET28a-115,并将重组质粒转化至BL21(DE3)细胞。经IPTG诱导后,收集菌液进行SDS-PAGE和Western-bolt鉴定,结果显示,在16kD处有一条明显的蛋白表达条带。对表达产物进行可溶性分析,结果表达蛋白50%为可溶性蛋白,经Ni-NTA亲和层析纯化后获得了较高浓度和纯度的目的蛋白。研究结果表明,含FMDV 3D蛋白前115位氨基酸的重组蛋白在大肠杆菌中得到了高效可溶性表达,并具有较好的抗原活性,为开发口蹄疫诊断试剂和基因工程疫苗奠定了基础。

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