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可可毛色二孢β-1,4-葡聚糖内切酶LtEg1信号肽的鉴定及其酶活性分析

文献类型： 中文期刊

作者： 彭军波 1 ; 李兴红 1 ; 张玮 1 ; 刘梅 1 ; 邢启凯 1 ; 燕继晔 1 ;

作者机构： 1.北京市农林科学院植物保护环境保护研究所

关键词： 可可毛色二孢;β-1,4-葡聚糖内切酶;信号肽;酶活性

期刊名称： 植物保护学报

ISSN： 0577-7518

年卷期： 2020 年 001 期

页码： 119-126

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为明确可可毛色二孢β-1,4-葡聚糖内切酶LtEg1是否能够分泌至胞外及其活性,采用酵母互补试验分析了内切酶LtEg1的信号肽活性,利用3,5-二硝基水杨酸法检测了内切酶LtEg1活性,通过实时荧光定量PCR测定了LtEg1基因在不同侵染阶段的表达量.内切酶LtEg1的信号肽和酵母蔗糖酶的融合表达能够引起酵母蔗糖酶的外泌,使得酵母转化子能够在以棉子糖为唯一碳源的培养基上生长.内切酶LtEg1能够以羧甲基纤维素钠为底物,发挥其酶活功能.与营养菌丝阶段相比,LtEg1基因在病原菌侵染阶段的表达水平显著升高;且在接种后48 h,LtEg1基因的表达量达到高峰,约为营养菌丝阶段的12倍,表明内切酶LtEg1作为重要的外泌蛋白酶,在可可毛色二孢侵染致病过程发挥了重要作用.

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