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柱花草炭疽菌致病力丧失突变菌株1869的T-DNA插入位点侧翼序列的克隆

文献类型: 中文期刊

作者: 许沛冬 1 ; 郑肖兰 2 ; 赵艳 1 ; 李秋洁 2 ; 吴伟怀 2 ; 贺春萍 2 ; 习金根 2 ; 梁艳琼 2 ; 郑金龙 2 ; 戚山江 1 ; 张晓波 3 ; 易克贤 2 ;

作者机构: 1.海南大学农学院

2.中国热带农业科学院环境与植物保护研究所

3.热带作物种质资源保护与开发利用教育部重点实验室

关键词: 柱花草;炭疽菌;T-DNA;致病力;基因克隆

期刊名称: 草业学报

ISSN: 1004-5759

年卷期: 2015 年 24 卷 08 期

页码: 142-149

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 通过对实验室已构建的柱花草炭疽菌T-DNA突变体库中各转化子致病力的测定,获得致病力丧失突变菌株1869。对其进行PCR检测以验证T-DNA在1869基因组中插入情况,并测定观察其菌落直径、菌落形态及产孢量等生物学特性,利用TAIL-PCR克隆标记基因侧翼序列,采用生物信息学方法比对基因信息。结果表明,与柱花草炭疽菌野生型菌株CH008相比,突变菌株1869表现致病力丧失,菌落生长速率也显著低于野生型;然而,在分生孢子形态、产孢能力、孢子萌发率等方面与野生型并无明显差异。TAIL-PCR扩增得到T-DNA插入位点RB端序列467bp,LB端侧翼序列388bp,经两侧序列拼接比对,所得序列与Pac1同源性达到92%~96%,推测可能由于基因表达产物调节菌株对pH值的敏感性,从而影响了其致病过程。

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