文献类型： 中文期刊

作者： 令狐远凤 ¹ ; 杨阳 ¹ ; 潘永 ² ; 段世宇 ¹ ; 张家莉 ¹ ; 张宝太 ¹ ; 杨琦 ¹ ;

作者机构： 1.贵州大学动物科学学院

2.贵州省农业科学院畜牧兽医研究所

关键词： 沙门氏菌;λ-red同源重组系统;伴侣蛋白Hfq;外膜蛋白

期刊名称： 福建农林大学学报(自然科学版)

ISSN： 1671-5470

年卷期： 2022 年 51 卷 005 期

页码： 636-643

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 通过5'RACE技术分析fadL、ompN、ybfM mRNA的5'UTR,并筛查fadL、ompN、ybfM mRNA 5'UTR中Hfq结合偏好型基序(ARN)n.利用λ-Red同源重组酶和FLP重组酶系统构建fadL、ompN、ybfM基因(ARN)n基序缺失基础上的lacZ基因融合菌株,运用P22噬菌体转导技术构建相应的hfq基因缺失菌株,通过β-半乳糖苷酶试验检测重组菌株的蛋白水平.结果显示,fadL中筛选出ARN-1(AAAAAA)、ARN-2(AAAAATAAT),其缺失降低了fadL的蛋白表达量,分别降低72%、56%;ompN中筛选出ARN-1(GTTTTT)、ARN-2(TCTTTT)、ARN-4(TTTGCT),其缺失提高了ompN的蛋白表达量,分别提高了1.29、1.30、1.07倍,ARN-3(ATTATT)缺失使ompN的蛋白表达量降低了10%;ybfM中筛选出ARN-1(AAGAGG)、ARN-2(AGCAAT)、ARN-3(AGTAAA)、ARN-4(AAAAATAGT)、ARN-5(AACAGAAAG),其缺失均增加了ybfM蛋白水平变化,分别为4.20、3.99、10.90、227.00、46.00倍.结果表明,ybfM、ompN、fadL中(ARN)n位点不同缺失能导致ybfM、ompN、fadL表达水平出现上调或下调,部分(ARN)n序列缺失可影响Hfq对相应靶基因蛋白水平调控作用.