文献类型: 中文期刊
作者: 于永生 1 ; 曹阳 2 ; 罗晓彤 2 ; 张树敏 2 ;
作者机构: 1.中国农业科技东北创新中心
2.吉林省农业科学院畜牧分院
关键词: 合成启动子;肌肉特异表达载体;ω-3脂肪酸去饱和酶;体外验证
期刊名称: 生物技术
ISSN: 1004-311X
年卷期: 2011 年 21 卷 06 期
页码: 14-17
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 目的:构建肌肉特异性表达线虫ω-3脂肪酸去饱和酶的肌肉特异性载体,证明其表达的有效性。方法:化学合成292bp的带有肌肉特异性转录因子结合位点的DNA序列,然后与线虫ω-3脂肪酸去饱和酶基因cDNA、去除CMV启动子的表达载体pcDNA3.1连接构成肌肉特异性表达载体pcDNA3.1-SF,4w龄C57BL/6小鼠肌肉注射该重组载体,RT-PCR检测证明其表达有效性。结果:DNA测序结果证明合成的292 bp片段带有肌肉特异性表达元件;PCR鉴定显示启动子片段正确地插入到目的基因上游;RT-PCR鉴定显示肌肉内ω-3脂肪酸去饱和酶基因得到有效转录。结论:该试验为在转基因动物的肌肉中表达外源基因奠定了基础。
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