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含有MAR序列的STI-STII-LTB融合基因在苜蓿中的表达

文献类型： 中文期刊

作者： 武冬梅 1 ; 陈创夫 2 ; 祝建波 3 ; 李冀新 1 ;

作者机构： 1.新疆农垦科学院

2.石河子大学

3.新疆兵团

关键词： 苜蓿;MAR序列;STI基因;STII基因;LTB基因

期刊名称： 扬州大学学报(农业与生命科学版)

ISSN： 1671-4652

年卷期： 2007 年 28 卷 02 期

页码： 87-91

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 产肠毒素性大肠杆菌(ETEC)LT和ST是导致人和动物腹泻的主要病原菌。利用三引物PCR法和酶切实现了STI、STII、LTB基因的融合,LTB基因的5′位于STII基因的3′端,三者在同一阅读框。将融合基因STI-STII-LTB构建到带有核基质结合区序列(MARs)的植物表达载体pBI121-MARs中GUS基因的位置。同时构建不含MARs序列的重组质粒。重组质粒pBI121-MARs-STI-STII-LTB、pBI121-STI-STII-LTB通过冻融法转化根癌农杆菌,并通过农杆菌介导法转化杂花苜蓿。转基因苜蓿植株经PCR检测、Southern-blotting分析表明,转基因苜蓿植株基因组中可检测到STI-STII-LTB融合基因;提取转基因苜蓿植株总蛋白质,SDS-PAGE结果显示,转基因植株表达了重组抗原蛋白,且含MAR序列的蛋白表达量要高于不含MAR序列的表达量;Western-dotting免疫检测证实转基因植株表达的重组抗原具有免疫原性。

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