文献类型： 中文期刊
作者： 房春豪 1 ; 陈志浩 1 ; 王开 1 ; 汪晓璐 1 ; 徐文竞 1 ; 祁广 1 ; 马朋涛 1 ; 韩冉 1 ; 刘成 1 ;
作者机构： 1.烟台大学生命科学学院;山东省农业科学院作物研究所/农业部黄淮北部小麦生物学与遗传育种重点实验室/小麦玉米国家工程实验室
关键词： 小麦miRNA;靶基因;Tae-miR9666a;GFP;本氏烟草
期刊名称： 山东农业科学
ISSN： 1001-4942
年卷期： 2024 年 56 卷 002 期
页码： 1-7
收录情况： 北大核心
摘要： miRNA是一类内源非编码单链小RNA,广泛存在于动植物中,主要通过切割靶基因或者抑制靶基因表达参与细胞分化、生长和发育等多种生物学调控.目前缺少一种快速简便验证miRNA靶基因的方法.本研究基于前期筛选到的小麦特有的miRNA——Tae-miR9666a,合成其前体及前体突变体,并连接到表达载体上,构建含有GFP(绿色荧光蛋白)标记的靶基因过表达载体,共转化烟草,通过观察GFP的荧光亮度判断靶基因的切割情况,以此来验证miRNA与靶基因的相互作用.结果发现,共转miRNA前体的烟草叶片的荧光亮度较低,表明靶基因被miRNA切割,其后的GFP无法正常表达;共转miRNA前体突变体的烟草叶片的荧光亮度与单转靶基因的相当,表明miRNA前体突变体未切割靶基因,导致GFP 正常表达.本实验有效证明了miRNA的靶基因切割情况,也表明利用烟草验证miRNA与靶基因相互作用是可行的.
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