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番鸭呼肠孤病毒MW9710株δC蛋白基因在毕赤酵母中表达

文献类型: 中文期刊

作者: 欧阳岁东 1 ; 林锋强 1 ; 王劭 1 ; 陈仕龙 1 ; 程晓霞 1 ; 朱小丽 1 ; 胡奇林 1 ; 陈少莺 1 ;

作者机构: 1.福建省农业科学院畜牧兽医研究所

关键词: 番鸭呼肠孤病毒;δC蛋白基因;毕赤酵母;表达

期刊名称: 福建农业学报

ISSN: 1008-0384

年卷期: 2010 年 25 卷 03 期

页码: 241-244

摘要: 将番鸭呼肠孤病毒MW9710株的σC蛋白基因与毕赤酵母分泌性表达载体pPIC9K相连接,构建重组表达载体pPIC9Kσ-C,转化大肠杆菌DH5α,经PCR、酶切和测序鉴定,基因序列完全正确。纯化的重组质粒pPIC9Kσ-C用内切酶SacⅠ线性化,电转化毕赤酵母,使重组表达载体与酵母染色体发生同源整合,采用G418抗性梯度法筛选多拷贝重组菌株,用甲醇进行诱导表达,通过SDS-PAGE和Western-blot分析表达产物,结果表明目的蛋白得到了高效表达,并且具有免疫反应性。

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