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杜仲EuERD16基因的克隆及功能分析

文献类型: 中文期刊

作者: 李波 1 ; 曾琴 2 ; 赵丹 3 ; 赵德刚 4 ;

作者机构: 1.贵州大学农业生物工程研究院/生命科学学院

2.山地植物资源保护与种质创新教育部重点实验室

3.贵州省农业科学院

4.贵州省生物技术研究所/植物保育技术应用工程研究中心

关键词: 杜仲;EuERD16基因;泛素延伸蛋白;表达分析;干旱胁迫

期刊名称: 基因组学与应用生物学

ISSN: 1674-568X

年卷期: 2023 年 04 期

页码: 373-383

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 脱水诱导早期应答(Early Responsive to Dehydration, ERD)基因是在干旱胁迫下可以快速应答的基因。本研究克隆了杜仲(Eucommia ulmoides)EuERD16基因,对其进行生物信息学分析,采用实时定量PCR技术分析EuERD16基因在杜仲不同组织和胁迫下的表达情况,进而构建过表达载体,采用农杆菌介导法获得过表达EuERD16基因烟草(Nicotiana tabacum)植株,分析EuERD16基因在烟草中的抗旱功能。结果发现,EuERD16基因的CDS序列长度为387 bp,编码128个氨基酸,与拟南芥(Arabidopsis thaliana)AtERD16序列相似性较高,均为1个泛素单体(76个氨基酸)融合1个60S核糖体亚基L40(52个氨基酸),属于泛素延伸蛋白亚族,该基因启动子区域含有光、干旱和低温等响应元件。在杜仲幼苗中,EuERD16基因在茎和根中表达较高,在成年期杜仲树中,EuERD16基因在3月、5月的雌雄叶和7月的雌果中表达较高,并受到20%PEG6000模拟干旱、蓝光和低温胁迫的信号诱导。干旱胁迫下,转EuERD16基因烟草比野生型烟草的萎蔫程度轻,且其CAT、SOD、POD酶活性和脯氨酸含量显著高于对照组的(P<0.05),H_2O_2、O_2~-和MDA含量显著低于对照组的(P<0.05)。结果表明EuERD16参与杜仲干旱胁迫反应,为进一步研究杜仲抗旱分子机制提供了参考。

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