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CRISPR-Cas9技术敲除甜瓜eIF4E基因表达载体的构建

文献类型： 中文期刊

作者： 杨晶 1 ; 王旭辉 1 ; 王东 1 ; 李冠 1 ;

作者机构： 1.新疆大学生物工程研究中心;新疆农业科学院生物质能源研究所;新疆喀什大学

关键词： 甜瓜;CRISPR/Cas9;eIF4E;载体构建

期刊名称： 新疆农业科学

ISSN： 1001-4330

年卷期： 2018 年 05 期

页码： 821-828

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】构建甜瓜e IF4E基因的CRISPR-Cas9植物基因编辑系统的gRNA表达载体。为研究eIF4E基因功能奠定基础。【方法】以新疆主栽甜瓜皇后为材料,在eIF4E基因的第一个外显子区设计gRNA引物,以载体pP1C.4为模板,扩增获得sgRNA克隆框,使用EcoR I、XbaI双酶切pP1C.4载体,利用DNA重组酶构建重组载体p P1C.4-eIF4E。【结果】经菌落PCR检测和测序,gRNA已经成功连接到植物基因敲除载体pP1C.4。【结论】构建了植物基因敲除载体pP1C.4-e IF4E,pP1C.4-e IF4E能对eIF4E基因进行定向编辑。

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