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青岛文昌鱼(Branchiostoma belcheritsingtauense)染色体荧光原位杂交条件研究

文献类型: 中文期刊

作者: 赵婷婷 1 ; 王昌留 2 ; 张广珍 2 ; 王俊刚 2 ; 黄玲 2 ; 王磊 2 ;

作者机构: 1.鲁东大学生命科学院

2.鲁东大学生命科学院;中国热带农业科学院热带生物技术研究所

关键词: 青岛文昌鱼;染色体;荧光原位杂交

期刊名称: 海洋与湖沼

ISSN: 0029-814X

年卷期: 2012 年 43 卷 06 期

页码: 1187-1191

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 采用青岛文昌鱼18SrDNA序列为探针进行荧光原位杂交,根据囊胚晚期细胞上的核杂交信号多少及特异性确立青岛文昌鱼染色体荧光原位杂交的最佳反应条件。结果表明适合于青岛文昌鱼染色体荧光原位杂交的条件为:预处理采用5ng/μl的胃蛋白酶处理3—5min和10ng/μlRNA酶处理1h;100—300倍探针浓度的鲑鱼精DNA进行封闭;50%甲酰胺/2×SSC,1×SSC,2×SSC,42℃的洗脱强度;3%BSA进行抗体封闭;杂交时间可以控制在12—18h;杂交温度保持37℃;PI(1.5μg/ml)的量每片20μl以内。

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