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鸡传染性喉气管炎病毒PCR检测方式的建立和应用

文献类型: 中文期刊

作者: 李海利 1 ; 易秀玲 2 ; 郎利敏 1 ; 徐引弟 1 ; 焦文强 1 ; 张立宪 1 ; 张青娴 1 ; 游一 1 ; 王克领 1 ;

作者机构: 1.河南省农业科学院畜牧兽医研究所

2.河南农业大学牧医工程学院

关键词: 鸡传染性喉气管炎病毒;PCR;检测

期刊名称: 现代畜牧兽医

ISSN: 1672-9692

年卷期: 2016 年 03 期

页码: 1-7

摘要: 根据GenBank传染性喉气管炎病毒(ILTV)基因序列,设计合成了1对特异性引物。以ILTV DNA为模板,建立了检测ILTV的PCR检测方法。通过优化PCR反应条件,成功扩增出一条约690 bp的目的基因片段。而鸡传染性法氏囊病病毒、新城疫病毒、传染性支气管炎病毒、禽流感病毒基因组均未扩增为出相应的片段。敏感性试验检测出其DNA最小检出量为10-2μg。重复性试验中对3份检测为传染性喉气管炎病毒阳性病料进行检测,发现3次重复检测的结果完全一致。临床应用中运用上述优化的PCR反应条件进行PCR检测临床送检的16份疑似鸡传染性喉气管炎病毒感染病料,结果显示检出阳性样品6份,将阳性样品的PCR扩增产物克隆后序列分析显示均为鸡传染性喉气管炎病毒。结果表明,建立的PCR方法具有良好的特异性,敏感性和稳定性,可应用于传染性喉气管炎病毒鉴定和临床诊断。

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