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野生黄花苜蓿冷诱导基因克隆及序列分析

文献类型： 中文期刊

作者： 刘亚玲 1 ; 王俊杰 1 ; 云锦凤 1 ; 赵彦 1 ; 石凤敏 1 ;

作者机构： 1.内蒙古农业大学生态环境学院

关键词： 黄花苜蓿;冷诱导基因;克隆;序列分析

期刊名称： 生物技术通报

ISSN： 1002-5464

年卷期： 2010 年 2010 卷 04 期

页码： 108-111+121

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 根据紫花苜蓿抗寒基因cas15B(登录号:L12462)的cDNA序列,设计1对特异引物,以经过低温胁迫的黄花苜蓿总RNA为模板,采用RT-PCR方法克隆获得了550bp的cDNA片段。测序和序列分析结果表明,扩增片段长度为550bp,编码159个氨基酸。主要由Gly(甘氨酸)、Glu(谷氨酸)、His(组氨酸)、Lys(赖氨酸)这4种氨基酸组成,占总量的70%。含1个重复了5次的10肽基序,其序列为Lys-Gly-Glu-Gln-His-Gly-His(Phe)-Val(Leu)-Gly-Gly。经序列比较分析,该片段与紫花苜蓿冷诱导基因CAS15B的核苷酸、氨基酸的同源性均为90%,命名为MfCAS15-1。亚细胞结构定位分析结果显示,MfCAS15-1是一种定向到核的蛋白,在调节或维持核的结构与功能方面起作用。本研究在黄花苜蓿中成功获得了抗寒基因同源序列,为最终克隆黄花苜蓿MfCAS15-1抗寒基因全长奠定了基础。

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