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Drebrin蛋白对PEDV在Vero细胞中增殖影响的研究

文献类型： 中文期刊

作者： 吕家煌 1 ; 朱明君 1 ; 尹力鸿 1 ; 李天娇 1 ; 索朗斯珠 1 ; 李彬 1 ;

作者机构： 1.西藏农牧学院动物科学学院;江苏省农业科学院兽医研究所

关键词： Drebrin;猪流行性腹泻病毒;Vero细胞;真核表达

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2022 年 44 卷 011 期

页码： 1135-1140

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 已有研究发现发育调节脑蛋白(Drebrin)参与细胞间信息通讯、神经传递、肿瘤转移、精子发生等生命活动,但其对病毒的作用研究却很少.为研究Drebrin对猪流行性腹泻病毒(PEDV)增殖的影响,本研究根据GenBank登录的非洲绿猴Drebrin基因序列(XM_008015438.2)设计引物,经PCR从Vero细胞中扩增得到Drebrin基因,经测序后构建系统进化树分析其遗传进化关系.结果显示,Vero细胞Drebrin基因编码区(CDS)长2088 bp,编码695个氨基酸,且该基因相对保守,与其他物种Drebrin基因的同源性均较高.利用扩增的Drebrin基因构建真核表达载体pcDNA3.1-Drebrin-Flag,并以不同浓度转染Vero细胞后感染PEDV,利用RT-qPCR检测Vero细胞中PEDV mRNA的转录水平,采用western blot与间接免疫荧光试验(IFA)检测细胞中PEDV N蛋白的表达量,采用TCID50检测病毒滴度.结果显示,Vero细胞中过表达的Drebrin可显著抑制细胞内PEDV mRNA水平(P<0.01)和N蛋白表达量,降低细胞外病毒滴度,具有抑制PEDV增殖的作用,且抑制效率与转染质粒的浓度呈正相关.进一步利用激光共聚焦技术检测Drebrin与PEDV S蛋白的亚细胞定位,结果显示,Drebrin与S蛋白在细胞质中存在共定位现象,提示两种蛋白可能存在互作.本研究首次证明Drebrin对PEDV在Vero细胞中的增殖有抑制作用,为Drebrin的功能研究提供实验基础,也为抗PEDV机制相关研究提供参考.

  • 相关文献

[1]Drebrin restricts rotavirus entry by inhibiting dynamin-mediated endocytosis. Li, Bin,Ding, Siyuan,Feng, Ningguo,Mooney, Nancie,Ooi, Yaw Shin,Diep, Jonathan,Kelly, Marcus R.,Yasukawa, Linda L.,Jackson, Peter K.,Greenberg, Harry B.,Li, Bin,Ding, Siyuan,Feng, Ningguo,Yasukawa, Linda L.,Greenberg, Harry B.,Li, Bin,Ding, Siyuan,Feng, Ningguo,Yasukawa, Linda L.,Greenberg, Harry B.,Li, Bin,Mooney, Nancie,Kelly, Marcus R.,Jackson, Peter K.,Ren, Lili,Patton, John T.,Yamazaki, Hiroyuki,Shirao, Tomoaki.

[2]猪流行性腹泻病毒YL112株的M基因序列分析及其在Vero细胞的传代适应性研究. 蓝日国,张书晴,张金秋,苗晋锋. 2017

[3]无血清微载体培养Vero细胞增殖传染性法氏囊病毒. 吴培培,冯磊,唐应华,褚轩,王伟峰,侯继波. 2016

[4]二化螟鞘磷脂合酶相关基因CsSMSr的克隆、真核表达及表达谱分析. 郑作林,周瀛,杨琼,巩中军,程家安,祝增荣. 2013

[5]生长抑素基因疫苗pES/2SS的构建与表达. 曹少先,何晓红,孙延鸣,刘铁铮,杨利国. 2007

[6]山羊Viperin基因的克隆与真核表达载体的构建. 李照耀,李文良,吴铖楠,李基棕,郝飞,毛立,周斌,江杰元. 2017

[7]猪δ冠状病毒结构蛋白的表达及其多克隆抗体的制备. 张宝太,肖丽,钟纯燕,周金柱,黄金,袁雪松,蔡旭航,李思远,郭荣利,李基棕,李彬,主性. 2023

[8]犬干扰素α4在CHO细胞中的稳定表达. 王晶宇,欧阳伟,王永山,夏兴霞,诸玉梅. 2017

[9]犬瘟热病毒核衣壳蛋白基因在昆虫细胞中的表达及其抗原性分析. 毕振威,王永山,范红结. 2011

[10]硫化物-醌氧化还原酶(SQR)基因真核表达载体的构建及表达. 于峰祥,于建宁,王公金,潘伟芹,徐小波,徐志伟,花卫华,刘泉. 2011

[11]减蛋下降综合征病毒重组Knob-S基因在杆状病毒系统中的表达及其免疫原性鉴定. 郑金,陈滔,陆吉虎,高峰,候继波,黎满香,唐应华. 2015

[12]传染性法氏囊病安徽近期毒株VP2基因在昆虫细胞中的表达. 欧阳伟,王永山,张海彬,潘群兴,王晓丽,刘洁,周宇,曹冰玉,王忠灿. 2009

[13]鸭坦布苏病毒甲基转移酶的真核表达及鉴定. 韩凯凯,严若峰,刘青涛,刘宇卓,李银,赵冬敏,黄欣梅,杨婧. 2021

[14]转运真核表达盒的重组T7噬菌体构建. 徐海,鲍熹,王义伟,卢宇,许梦薇,侯继波. 2015

[15]猪流行性腹泻病毒3C样蛋白酶(3CLpro)的真核表达及生物信息学分析. 梁荣,丁芳艺,宋海鑫,张金秋,费荣梅. 2020

[16]猪流行性腹泻病毒TX株的分离鉴定及毒力分析. 于晓明,陈瑾,侯立婷,吴楠,侯继波,郑其升. 2015

[17]表达猪流行性腹泻病毒S基因片段重组腺病毒的构建与免疫特性. 韦显凯,侯继波,姜平. 2008

[18]我国华东地区猪流行性腹泻病毒ORF3基因的遗传变异分析. 邓小红,余伟权,李彬,孙冰,徐向伟,刘浩飞,何孔旺,郭容利,俞正玉. 2015

[19]PEDV亚单位疫苗免疫增强剂的筛选. 陈瑾,黄春娟,于晓明,侯立婷,乔绪稳,郑其升,侯继波. 2016

[20]2014-2016年我国江苏地区猪流行性腹泻病毒S基因的序列分析. 焦点,孙杰,茅爱华,俞正玉,郭容利,朱琳,范宝超,袁万哲,李郁,何孔旺,李彬. 2018

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