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表达猪源流感病毒HA基因重组伪狂犬病毒的构建

文献类型： 中文期刊

作者： 李敏 1 ; 向华 1 ; 张丽 1 ; 黄元 1 ; 王贵平 1 ; 宣华 1 ;

作者机构： 1.广东省农业科学院兽医研究所

关键词： SIV;HA基因;TK-;重组PRV

期刊名称： 中国人兽共患病学报

ISSN： 1002-2694

年卷期： 2009 年 25 卷 10 期

页码： 953-957

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 目的获得共表达H1N1和H3N2亚型猪源流感病毒(SIV)HA基因的重组伪狂犬病毒(PRV)。方法克隆H1N1以及H3N2亚型SIV的HA基因,将HA基因与PUC-TK转移载体进行酶切、连接来构建pUC-P-H1A-H3A重组表达质粒,用脂质体将其转染已感染PRV亲本病毒的Vero细胞,使其在Vero细胞内与PRV基因组发生同源重组。运用RT-PCR、间接免疫荧光等方法检测外源基因重组情况及其在Vero细胞内的表达,并通过Western-blot对表达产物进行免疫原性鉴定。结果实验结果显示,外源基因HA已重组入PRV基因组,并在Vero细胞中有效表达,且所表达蛋白具有免疫原性。结论HA基因重组PRV的构建成功为SIVHA基因重组PRV活载体疫苗的研究奠定了初步基础。

  • 相关文献

[1]4株H3N2亚型猪源流感病毒HA基因的序列测定与特性分析. 李敏,向华,宣华. 2009

[2]广东地区H9N2亚型禽流感病毒HA和NA基因生物学特征分析. 曾庆航,刘杨,孙敏华,胡鑫宇,谢梓民,张敏霞,袁朝霞,廖明. 2023

[3]H1N1亚型猪流感病毒HA和NA基因双重RT-PCR定型检测方法的建立与应用. 温肖会,蔡春梅,魏文康,翟少伦,吕殿红,贾春玲,袁洁,黄忠,周秀蓉. 2014

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