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鲤鱼春季病毒出血症病毒G基因在昆虫细胞中的表达与鉴定

文献类型： 中文期刊

作者： 李月红 1 ; 付云红 1 ; 陈奇 2 ; 王永志 2 ; 扈荣良 3 ;

作者机构： 1.吉林农业大学动物科技学院

2.解放军军事医学科学院军事兽医研究所

3.吉林省农业科学院

关键词： 鲤鱼春季病毒出血症病毒;G基因;杆状病毒表达

期刊名称： 中国兽医学报

ISSN： 1005-4545

年卷期： 2012 年 32 卷 04 期

页码： 505-508

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 采用RT-PCR方法扩增鲤鱼春季病毒出血症病毒(SVCV)的糖蛋白(G)基因,将PCR产物插入到杆状病毒转移载体pFastBac 1中,获得重组转移载体pFastBac 1-G,将其转化入含有Bacmid的DH10Bac感受态细胞中,经3种抗性和蓝白斑筛选,获得含有G基因的重组穿梭质粒rBacmid-G。在脂质体转染试剂的介导下,将rBacmid-G转染sf9细胞,获得重组杆状病毒。提取重组杆状病毒基因组,用M13引物PCR鉴定。对重组杆状病毒感染的sf9细胞,通过电镜观察、SDS-PAGE、Western blotting进行检测,结果表明,重组蛋白在sf9细胞中获得正确表达,相对分子质量约58 000,与鼠抗SVCV阳性血清具有良好的反应原性。本试验为研究鲤鱼春季病毒出血症病毒G蛋白的生物学活性和亚单位疫苗的研制奠定了基础。

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