文献类型： 中文期刊

作者： 董世娟 ¹ ; 冯蒙 ¹ ; 于瑞嵩 ¹ ; 谢春芳 ¹ ; 陈冰清 ¹ ; 李震 ¹ ;

作者机构： 1.上海市农业科学院畜牧兽医研究所上海市农业遗传育种重点实验室

关键词： 牛传染性鼻气管炎病毒;环介导等温扩增方法;gB基因

期刊名称： 生物工程学报

ISSN： 1000-3061

年卷期： 2018 年 10 期

页码： 1587-1595

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 根据牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)gB基因保守序列(GenBank Accession No. DQ006857.1),利用Primer ExplorerV4软件设计3对LAMP引物,通过反应体系的优化、敏感性试验和特异性试验,建立IBRV的LAMP检测方法,并对393份临床样本进行了检测应用。结果显示,建立的IBRV LAMP方法在65℃、50 min条件下可扩增出LAMP特征性梯状条带,并可通过颜色变化判定结果。该方法可以检测到10copies/μL的质粒DNA,与nested-PCR方法的敏感性相当,比PCR方法敏感1000倍,且与牛病毒性腹泻病毒、猪伪狂犬病毒、水泡口炎病毒等均无交叉反应。应用该方法检测301份鼻腔拭子和92份血清样本,阳性率分别为87.6%和58.8%,表明鼻腔棉拭子更适用于IBRV的临床检测。文中建立的IBRV LAMP方法具有可视化、快速、特异、灵敏性强的优势,适合基层和现场对临床样本进行快速检测,为IBR的防控提供了技术支撑。