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青虾transformer-2基因RNA干扰规律的研究

文献类型: 中文期刊

作者: 江丰伟 1 ; 傅洪拓 1 ; 乔慧 2 ; 张文宜 2 ; 蒋速飞 2 ; 熊贻伟 2 ; 孙盛明 2 ; 龚永生 2 ; 金舒博 2 ;

作者机构: 1.南京农业大学渔业学院

2.中国水产科学研究院淡水渔业研究中心

关键词: 青虾;RNAi;transformer-2;注射剂量;注射部位;干扰规律

期刊名称: 中国农学通报

ISSN: 1000-6850

年卷期: 2014 年 30 卷 32 期

页码: 32-37

收录情况: CSCD

摘要: 通过对青虾性别调控相关基因transformer-2(tra-2)的RNA干扰规律进行研究,探讨了tra-2基因RNA干扰的最适注射部位、注射剂量、干扰效果以及干扰规律等。通过对青虾肌肉、心脏、围心腔和眼柄基部注射比较发现,围心腔注射死亡率最低,适宜RNA干扰研究。采用4μg/g的dsRNA剂量进行时间依赖性干扰试验,RT-PCR检验注射后第1,7,14天的卵巢tra-2表达量,结果显示第7天基因表达量出现显著降低(P<0.05)。不同剂量水平(0.4μg/g、4μg/g以及12μg/g)干扰研究发现,0.4μg/g dsRNA没有干扰结果,4μg/g和12μg/g剂量的干扰效果均显著。与4μg/g的剂量相比,12μg/g的dsRNA能在较短时间内起到明显的干扰效果,且能持续较长的时间,表明干扰规律会随着剂量的改变而变化。但两组tra-2的最低表达量分别为正常水平的23%和21%,无显著差异(P>0.05)。

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