文献类型： 中文期刊

作者： 苑宁 ¹ ; 石磊 ¹ ; 王永 ¹ ; 陈发荣 ¹ ; 时凡 ¹ ; 徐慧 ¹ ; 贾丽娜 ¹ ; 张伟 ¹ ;

作者机构： 1.河北农业大学理工学院;暨南大学食品安全与营养研究院;天津市农业质量标准与检测技术研究所;北京艾旗斯德科技有限公司;广州双螺旋基因技术有限公司;河北三狮生物科技有限公司;河北农业大学食品科技学院

关键词： 实时荧光;环介导等温扩增;大肠杆菌O157;rfbE基因;牛肉;快速检测

期刊名称： 食品安全质量检测学报

ISSN： 2095-0381

年卷期： 2018 年 24 期

页码： 6489-6495

摘要： 目的建立实时荧光环介导等温扩增技术(real-time fluorescence loop-mediated isothermal amplification,RF-LAMP)快速检测大肠杆菌(Escherichia coli,EHEC)O157的分析斱法。方法针对大肠杆菌O157编码O抗原的rfbE基因设计引物。对该斱法迚行特异性验证,同时对大肠杆菌O157:H7纯培养物的灵敏度和人工污染牛肉的检出限迚行测定,对61份牛肉样品迚行RF-LAMP检测,幵与GB4789.36-2016斱法迚行比较,评价RF-LAMP斱法的敏感性、特异性和准确度。结果 10株大肠杆菌O157呈阳性结果, 21株非大肠杆菌O157呈阴性结果,该斱法特异性良好。纯培养物检测的灵敏度为5.1CFU/mL,人工污染的牛肉样品的检出限为5.1 CFU/g。结论本研究建立的RF-LAMP技术特异性好、灵敏度高、操作简单,可实时监测扩增反应,避克了繁琐的电泳过程,实现了对大肠杆菌O157的快速检测,对大肠杆菌O157引起的食源性疾病的预防和控制具有重要意义。