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大豆CDDP分子标记技术体系的优化、验证及引物筛选

文献类型: 中文期刊

作者: 李强 1 ; 苏二虎 2 ; 高聚林 1 ; 李丽君 3 ; 谢岷 1 ; 于晓芳 1 ;

作者机构: 1.内蒙古农业大学农学院

2.内蒙古自治区农牧业科学院玉米研究所

3.内蒙古自治区种子管理站

关键词: 大豆;CDDP;正交设计;体系验证;引物筛选

期刊名称: 大豆科学

ISSN: 1000-9841

年卷期: 2013 年 32 卷 03 期

页码: 310-315,320

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: CDDP分子标记是一种新型目的基因分子标记技术。采用L16(45)正交试验设计对影响大豆CDDP-PCR反应的Mg2+浓度、Taq DNA聚合酶用量、引物浓度、dNTPs浓度和模板DNA用量等因素进行优化。优化后的大豆CDDP-PCR体系为:Mg2+浓度2.0 mmol.L-1、Taq聚合酶用量1.5 U、引物浓度0.375μmol.L-1、dNTPs浓度0.3 mmol.L-1、DNA模板用量40 ng。该反应体系在16个大豆品种的验证中表现稳定可靠。利用大豆品种吉育75、本地黑豆及其9株F2代对该反应体系进行了初步的遗传验证,结果显示,杂交后代植株中出现了双亲的位点及亲本位点的缺失。并从21条引物中筛选出条带清晰、多态性较好的13条引物。该反应体系的建立为大豆种质遗传多样性分析、遗传连锁图谱构建及分子标记辅助育种奠定了基础。

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