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草鱼胰岛素样生长因子-I的融合表达、纯化和抗血清制备

文献类型： 中文期刊

作者： 叶星 1 ; 白俊杰 2 ; 劳海华 2 ; 简清 2 ; 李英华 2 ; 罗建仁 2 ;

作者机构： 1.中国水产科学研究院珠江水产研究所农业部热带亚热带鱼类选育与养殖重点开放实验室

2.中国水产科学研究院珠江水产研究所农业部热带亚热带鱼类选育与养殖重点开放实验室,中国水产科学研究院珠江水产研究所农业部热带亚热带鱼类选育与养殖重点开放实验室,中国水产科学研究院珠江水产研究所农业部热带亚热带鱼类选育与养殖重点开放实验室,中国水产科学研究院珠江水

关键词： 草鱼;胰岛素样生长因子I;融合表达;纯化;抗血清

期刊名称： 水产学报

ISSN： 1000-0615

年卷期： 2002 年 26 卷 02 期

页码： 122-126

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 采用PCR方法改造已克隆到的草鱼胰岛素样生长因子 Ⅰ (IGF Ⅰ )cDNA ,使其成为成熟肽cDNA并亚克隆到pGEX 4T 1载体中 ,构建草鱼IGF I融合蛋白表达质粒pGEX IGF。质粒转化大肠杆菌BL2 1菌株。该菌株经IPTG诱导可表达分子量约 34kD的特异蛋白。在不同的温度条件下分别产生以可溶性的和包涵体形式为主的特异蛋白。经 30℃诱导的菌体经溶菌酶消化、超声破碎及高速离心后 ,裂解液上清经glutathionesepharose亲和层析纯化获得高纯度的GST IGF。以此纯化的融合蛋白为抗原制备兔抗草鱼IGF I的抗血清。凝胶双扩散试验显示抗血清效价为 1∶6 4 ,说明表达产物具免疫原性

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