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赭曲霉毒素A模拟表位的筛选及免疫学鉴定

文献类型: 中文期刊

作者: 王耀 1 ; 胡骁飞 1 ; 裴亚峰 1 ; 赵东 1 ; 刘运超 1 ; 张改平 1 ; 李志西 2 ; 邓瑞广 1 ;

作者机构: 1.河南省农业科学院/农业部动物免疫学重点实验室

2.西北农林科技大学食品科学与工程学院

关键词: 噬菌体随机七肽库;赭曲霉毒素A;模拟表位;单克隆抗体

期刊名称: 核农学报

ISSN: 1000-8551

年卷期: 2012 年 26 卷 09 期

页码: 1271-1277

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 从噬菌体随机七肽库中筛选得到赭曲霉毒素A的模拟表位,并以其替代毒素标品建立赭曲霉毒素A免疫学快速检测方法。以纯化的抗赭曲霉毒素A单克隆抗体(OTA mAb)为配基,亲和筛选融合表达在丝状M13噬菌体次要衣壳蛋白(PⅢ)上的随机七肽库,以ELISA方法鉴定阳性克隆,并以筛选的模拟表位建立赭曲霉毒素A的ELISA检测方法。经过4轮亲和筛选,共得到22株与OTA mAb特异结合的阳性噬菌体克隆,且该结合都能够被OTA标品阻断,DNA测序及多肽核心序列分析后,得到赭曲霉毒素A的模拟表位的主要序列为:MPLWXDL,X为任意氨基酸,以阳性噬菌体克隆建立的竞争ELISA检测方法,线性范围为250~8000pg/ml。基于制备的OTA mAb,利用噬菌体随机七肽库可成功筛选到赭曲霉毒素A的模拟表位,并能够替代OTA标品建立直接竞争模式的免疫学快速检测方法。

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