文献类型： 中文期刊
作者： 王凯琳 1 ; 胡乔木 2 ; 陈松林 3 ;
作者机构： 1.农业部海洋渔业可持续发展重点实验室中国水产科学研究院黄海水产研究所
2.上海海洋大学水产与生命学院
3.中国水产科学研究院长江水产研究所
关键词： 半滑舌鳎;性别相关基因;CSFR2;重组蛋白;生物活性
期刊名称： 渔业科学进展
ISSN： 2095-9869
年卷期： 2015 年 36 卷 02 期
页码： 30-36
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 通过对半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)进行全基因组及转录组测序,预测了一个半滑舌鳎性别相关基因CSFR2,目前已对该基因进行了克隆和表达分析。为进一步研究CSFR2基因的功能,本研究从蛋白层面入手,构建了原核表达载体p ET-32a-CSFR2,转化到大肠杆菌E.coli进行诱导表达,用His Trap进行蛋白纯化,SDS-PAGE电泳检测诱导及纯化产物,并将表达纯化的CSFR2蛋白注射1龄半滑舌鳎精巢。由于CSFR2是一个性别相关基因,因此无法通过免疫反应来直接检测其蛋白活性,本研究通过不同时间点取样检测半滑舌鳎其他性别相关基因Cyp19a和Foxl2的表达量变化,来间接反应CSFR2蛋白的活性及功能。实验结果显示,重组蛋白能够进入到活体细胞内并发挥一定作用,在6–72 h内对性别相关基因Cyp19a和Foxl2的表达有上调作用,说明CSFR2蛋白具有生物活性,并能调节其他性别相关基因的表达量,间接促进雄激素转化为雌激素。本研究进一步了解CSFR2基因在半滑舌鳎性别决定与分化中的作用,可为半滑舌鳎性别控制提供理论依据,在人工诱导鱼类性逆转方面有重要应用价值。此外,本研究为蛋白活性验证提供了一种新方法。
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