文献类型： 中文期刊

作者： 米立娟 ¹ ; 吕宗吉 ² ; 张守峰 ³ ; 刘晔 ³ ; 王永志 ⁴ ; 扈荣良 ¹ ;

作者机构： 1.吉林农业大学动物科学技术学院

2.佛山科学技术学院

3.军事医学科学院军事兽医研究所

4.吉林省农业科学院

关键词： 猪繁殖与呼吸综合征病毒;N蛋白;单克隆抗体

期刊名称： 吉林农业大学学报

ISSN： 1000-5684

年卷期： 2012 年 34 卷 06 期

页码： 74-79

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 克隆了猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)CC-11株的N基因全序列,将其克隆至原核表达载体pET28a,转化E.coliRosetta株后经0.5 mmol/L IPTG诱导,获得了高水平表达。对表达的N蛋白进行纯化,以50μgN蛋白免疫BALB/c小鼠,3次免疫后,取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞(SP2/0)进行融合,通过间接ELISA筛选,获得9B12、7C2、7C6共3株稳定分泌抗PRRSV-N蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞,亚型鉴定结果分别为IgG2b、IgG1、IgG1亚型。通过Western blot分析和间接免疫荧光测定表明,3株单抗对PRRSV CC-11株、CH-1R和JXA1-R细胞毒以及4份临床疑似病料均发生特异性反应。