文献类型： 中文期刊

作者： 张德玉 ¹ ; 吴宁一 ¹ ; 朱卫民 ¹ ; 管丽丽 ¹ ; 狄冽 ² ; 陈钧辉 ³ ;

作者机构： 1.江苏省农业科学院遗传生理研究所

2.南京农业大学土壤化学系

3.南京大学生物化学系

关键词： 穿梭质粒;α-淀粉酶基因;嗜热脂肪芽孢杆菌

期刊名称： 江苏农业学报

ISSN： 1000-4440

年卷期： 1993 年 01 期

页码： 55-56

摘要： α-淀粉酶是芽孢杆菌产生的一种胞外多糖酶(Stephen AO等,1983),在酒精、啤酒酿造、制糖和纺织工业上广泛使用。国内外科学家相继报道了α-淀粉酶基因的克隆(Palva I,1982; Mielenz JR,1983;Tsukagushi N 等,1984;周建华等,1986;任大明等,1987),但尚未能结合传统遗传育种方法得到高产的生产菌株。为了进一步研究α-淀粉酶基因在枯草芽孢杆菌中的表达,本实验将α-淀粉酶基因以很高转化率转化到枯草芽孢杆菌和大肠杆菌中,并能在两种宿主菌中复制和表达四环素抗性功能的穿梭质粒pHY300为载体,α-淀粉酶基因的亚克隆,在大肠杆菌HBl01中获得了表达,并将重组穿梭质粒pLE24转化到枯草芽孢杆菌168中。 1 材料和方法 1.1 材料 含有2.8Kb嗜热脂肪芽孢杆菌α-淀粉酶基因插入片段的质粒Pα 102系本实验室以质粒pUC 19为载体,利用鸟枪法从嗜热脂肪芽孢杆菌(As_1999)中克隆得到的。穿梭质粒pHY 300,购自日本宝酒造株式会社。大肠杆菌HB101(hsdR,hsdM,recAl3,supE-44,lacY,leuB6,thi~(-1))为中国预防医学科学院病毒学