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广东番茄黄化曲叶病毒AC2基因的原核表达及抗血清制备

文献类型： 中文期刊

作者： 赵芹 1 ; 李华平 2 ; 何自福 3 ; 佘小曼 3 ; 谢大森 1 ; 何晓明 1 ; 彭庆务 1 ;

作者机构： 1.广东省农业科学院蔬菜研究所

2.华南农业大学植物病毒研究室

3.广东省农业科学院植物保护研究所

关键词： 广东番茄黄化曲叶病毒;AC2基因;原核表达;抗血清制备

期刊名称： 华南农业大学学报

ISSN： 1001-411X

年卷期： 2011 年 32 卷 04 期

页码： 53-56

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 利用PCR方法从广东番茄黄化曲叶病毒分离物G3(Tomato yellow leaf curl Guang dong virus-[G3],TYLCGuV-[G3])全长序列的重组质粒上扩增该病毒的AC2基因,将其构建至原核表达载体pET-28b(+)上,经IPTG诱导,在大肠埃希菌Rosetta(DE3)Ⅲ中高效表达.SDS-PAGE电泳结果显示,目的融合蛋白与预期大小一致,相对分子质量约为19 500.以诱导的融合蛋白为抗原,免疫注射新西兰大耳白兔制备抗血清,间接ELISA测定抗血清效价为1∶16 384.Western-blotting检测结果表明,制备的抗血清有较好的抗原-抗体识别反应,为专化性抗血清.

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