文献类型： 中文期刊

作者： 杨振慧 ¹ ; 葛均青 ² ; 刘荭 ³ ; 杨金先 ² ; 郑晓聪 ³ ; 林天龙 ² ;

作者机构： 1.福建师范大学生命科学学院

2.福建省农业科学院生物技术研究所

3.深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心

关键词： 鲤春病毒血症病毒;基质蛋白基因;原核表达;多克隆抗体

期刊名称： 福建农林大学学报(自然科学版)

ISSN： 1671-5470

年卷期： 2011 年 40 卷 06 期

页码： 56-59

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 根据鲤春病毒血症病毒(SVCV)基因组序列(GenBank:NC_002803),人工合成M基因开放阅读框序列,克隆至原核表达载体pET-32a(+),转化工程菌株BL21(DE3),在0.1 mmol.L-1 IPTG、37℃下诱导5 h,获得高效表达的M蛋白,但其主要以包涵体的形式存在,经超声破碎、包涵体纯化后,再经Ni亲和层析柱纯化,获得高纯度的M蛋白.以纯化的M蛋白为抗原免疫新西兰大白兔,制备了M蛋白的多克隆抗血清.ELISA检测显示抗血清的效价达1∶128000;western blot分析显示抗血清能够识别SVCV的M蛋白,表明其具有较好的灵敏性和特异性.