文献类型： 中文期刊

作者： 刘梦婷 ¹ ; 于有利 ² ; 潘家良 ¹ ; 黄群涛 ¹ ; 王洪生 ³ ; 任建鸾 ¹ ; 汤芳 ¹ ; 戴建君 ⁴ ; 薛峰 ¹ ;

作者机构： 1.南京农业大学动物医学院

2.宁夏农林科学院动物科学研究所

3.中国医学科学院皮肤病医院

4.中国药科大学

关键词： 鸟苷酸结合蛋白5;巨噬细胞;极化;牛分枝杆菌

期刊名称： 微生物学通报

ISSN： 0253-2654

年卷期： 2023 年 003 期

页码： 1163-1178

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【背景】牛分枝杆菌（Mycobacterium bovis）是重要的人畜共患病原体，严重危害公共卫生安全。巨噬细胞是牛分枝杆菌感染的主要效应细胞，M1型巨噬细胞极化对于宿主免疫防御M. bovis感染至关重要。【目的】探讨鸟苷酸结合蛋白5（guanylate-binding protein 5, GBP5）对M. bovis感染的小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7细胞M1、M2型极化的影响，以及GBP5在M. bovis感染中的作用。【方法】通过前期转录组学数据分析筛选出差异基因GBP5，通过体内、体外验证M. bovis感染后的GBP5的表达水平。小干扰RNA下调细胞内GBP5表达，分别利用RT-q PCR、Western blotting和流式细胞术检测M1、M2型巨噬细胞表面标志物表达变化；平板菌落计数法检测GBP5对M. bovis在巨噬细胞中复制的影响；双荧光素酶报告基因试验检测GBP5对信号转导及转录激活蛋白3（signal transducer and activator of transcription 3, STAT3）转录调控；Western blotting检测活性氧（reactive oxygen species, ROS）抑制后STAT3的磷酸化情况。【结果】GBP5在M. bovis感染的RAW264.7细胞和C57BL/6小鼠组织中表达增加；下调GBP5后细胞内细菌CFU在感染后不同时间点均显著增加，ROS释放减少，M1型巨噬细胞表面标志物表达减少，但是对M2型巨噬细胞无显著影响；下调GBP5后抑制了STAT3的转录启动。ROS的产生抑制了STAT3的磷酸化。【结论】GBP5促进ROS的产生，调控ROS/STAT3通路，促进巨噬细胞向M1型极化，从而抑制细胞内牛分枝杆菌的存活。