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乙型脑炎病毒E蛋白抗原表位E39特异性单克隆抗体的制备

文献类型: 中文期刊

作者: 华荣虹 1 ; 王斌 2 ; 陈娜莎 2 ; 于海 2 ; 刘天强 2 ; 马红 3 ; 刘娣 1 ; 童光志 3 ;

作者机构: 1.东北林业大学博士后流动站

2.中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室

3.黑龙江省农业科学院畜牧研究中心博士后工作站

关键词: 乙型脑炎病毒;E蛋白;单克隆抗体;表位

期刊名称: 中国兽医科学

ISSN: 1673-4696

年卷期: 2008 年 38 卷 02 期

页码: 133-136

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为了制备乙型脑炎病毒E蛋白抗原表位特异性单克隆抗体,将编码乙型脑炎病毒E蛋白抗原表位E39的DNA序列进行人工合成,随后插入表达载体pGEX-6p-1的限制性酶切位点BamHⅠ与XhoⅠ之间,构建了表位肽与GST的融合表达质粒。该表位融合蛋白经亲和层析纯化后免疫BALB/c小鼠,按常规方法进行细胞融合。以化学合成的E39表位多肽为抗原,对融合细胞上清进行间接ELISA筛选。结果,筛选出1株分泌E39表位特异性抗体的杂交瘤细胞株,该杂交瘤细胞分泌抗体能力稳定。经鉴定,该单克隆抗体亚型为IgG2b,轻链类型为κ链。结果表明,用表位融合蛋白为抗原可以制备表位特异性单克隆抗体。

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