文献类型： 中文期刊

作者： 丁林云 ¹ ; 万可 ² ; 杨丹 ¹ ; 王同 ¹ ; 王春梅 ¹ ; 郭书巧 ¹ ; 杨霞 ¹ ;

作者机构： 1.江苏省农业科学院中心实验室/江苏省农业科学院种质资源与生物技术研究所

2.南京农业大学农学院

关键词： 菊花;原生质体;瞬时表达;亚细胞定位

期刊名称： 江苏农业学报

ISSN： 1000-4440

年卷期： 2023 年 002 期

页码： 518-524

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为探究用于亚细胞定位研究的菊花叶肉原生质体分离的最适条件，本研究以菊花无菌苗叶片为受体材料，分析不同叶龄叶片和酶解时间对菊花原生质体细胞产量的影响，并利用外源质粒的导入验证了聚乙二醇（PEG）介导的菊花原生质体瞬时转化体系。结果表明，以组织培养14 d的菊花无菌苗叶片为外植体材料，在含1.5%纤维素酶、0.4%离析酶和0.8 mol/L甘露醇的酶解液中振荡酶解6 h,能获得高产的原生质体细胞。采用PEG介导的瞬时转化含绿色荧光蛋白（GFP）的表达载体，在菊花原生质体细胞中观察到强烈的绿色荧光信号。结果显示，稗草乙烯转录因子基因（EcERF）在菊花原生质体中与本氏烟草叶片中的瞬时表达一致，EcERF基因定位于细胞核中。