文献类型： 中文期刊
作者： 王自良 1 ; 王建娜 2 ; 张海棠 1 ; 王选年 1 ; 杨艳艳 3 ; 张改平 3 ;
作者机构： 1.河南科技学院动物科学学院
2.西北农林科技大学医院
3.河南省动物免疫学重点实验室
关键词： 苯巴比妥;单克隆抗体;竞争ELISA;血药浓度;监测
期刊名称： 中国药学杂志
ISSN： 1001-2494
年卷期： 2006 年 41 卷 23 期
页码： 1826-1830
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 目的研制苯巴比妥单克隆抗体(PBmAb),建立PB血药浓度竞争ELISA监测方法。方法将PB改造成对氨基苯巴比妥(pAPB),用重氮化法合成免疫原BSA-pAPB并免疫Balb/c小鼠;细胞融合技术筛选PBmAb杂交瘤细胞株,体内诱生腹水法制备PBmAb;应用PBmAb研制PB血药浓度监测竞争ELISA试剂盒(PB-Kit),并测定其性能。结果BSA-pAPB偶联成功;筛选出4株杂交瘤细胞,应用其中最好的4E6株制备的PBmAb间接ELISA效价为1∶6·4×105,亲和常数(Ka)为2·08×1010L·moL-1,50%抑制浓度(IC50)为9·84μg·L-1,与巴比妥的交叉反应率(CR)为7·9%,与其他化合物无CR;PB-Kit的检测范围为1·0~128μg·L-1,灵敏度为0·89μg·L-1,检测限为1μg·L-1,血清样添加回收率为94·7%,批内和批间变异系数均<10%;PB-Kit与差示分光光度法(DS)的符合率为100%。结论成功研制出高价、敏感、特异的PBmAb,建立了PB血药浓度竞争ELISA监测方法。
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