文献类型： 中文期刊

作者： 陈平 ¹ ; 王斐 ¹ ; 谢建鹏 ¹ ; 张鉴 ¹ ; 何振富 ¹ ;

作者机构： 1.甘肃省农业科学院畜草与绿色农业研究所

关键词： 奶牛乳腺上皮细胞(CMECs);转化生长因子β激活激酶1(TAK1);炎症因子;相互作用

期刊名称： 中国兽医杂志

ISSN： 0529-6005

年卷期： 2025 年 61 卷 002 期

页码： 18-24

收录情况： 北大核心

摘要： 为了探索转化生长因子β激活激酶1(TAK1)调控奶牛乳腺上皮细胞（CMECs）炎症因子和趋化因子的机制，本试验通过生物信息学分析正常和乳腺炎CMECs信号通路；CMECs经细胞角蛋白18(CK-18)免疫荧光染色鉴定后分为对照组、过表达组和抑制组，对照组正常培养CMECs，过表达组CMECs转染2μg TAK1过表达质粒，抑制组CMECs转染2μg TAK1过表达质粒后加入TAK1抑制剂5Z-7-oxozeaenol，蛋白质免疫印迹（WB）检测CMECs中白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、核转录因子κB(NF-κB)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α)和巨噬细胞炎性蛋白1β(MIP-1β)含量，流式细胞仪检测CMECs干细胞标志物乙醛脱氢酶（ALDH）含量。生物信息学分析结果显示，CMECs发生炎症时，细胞免疫应答和细胞表面受体信号通路被激活，参与正向调控炎症反应的相关基因呈高水平表达；TNF-α与IL-1β、MIP-1α、MIP-1β、MCP-1、上游蛋白分化簇3(CD3)、分化簇8(CD8)和趋化因子配体5(CCL5)之间存在相互作用。WB结果显示，与对照组相比，过表达组TAK1，炎症因子IL-1β、TNF-α和NF-κB，趋化因子MIP-1α、MIP-1β和MCP-1蛋白表达极显著增强（P <0.01或P <0.001）；与过表达组相比，抑制组TAK1，炎症因子IL-1β、TNF-α和NF-κB，趋化因子MIP-1α、MIP-1β和MCP-1蛋白表达极显著受到抑制（P <0.001）。流式细胞仪检测发现，培养48 h之后，对照组ALDH阳性细胞率为6.7%，过表达组ALDH阳性细胞率为10.21%，抑制组ALDH阳性细胞率降为4.23%。本试验探究了TAK1与CMECs炎症因子和趋化因子之间的调控关系，为进一步治疗奶牛乳腺炎提供一定的试验支撑和理论依据。